그람 염색
Gramfarvning[1] / Gram Staining[2]
덴마크의 미생물학자인 한스 크리스티안 요아힘 그람(Hans Christian Joachim Gram)이 개발한 세균 염색법이다.
이 염색법을 통해 세포 벽의 펩티도글리칸 두께에 따라 모든 세균을 크게 두 가지로 분류할 수 있다. 그람 염색이 중요한 이유는, 양성이냐 음성이냐로 해당 균종을 배양 혹은 살균하는 적합한 방법을 찾을 수 있기 때문이다.
'''그람 염색의 과정은 다음과 같다.'''
이는 세균의 세포벽의 구성성분인 펩티도글리칸의 함량차이에 의한 것이다. 그람 양성균은 세포벽에 펩티도글리칸성분이 80% 정도로 많기 때문에 에탄올에 탈색되지 않아 크리스탈 바이올렛의 자색을 그대로 유지하는 반면, 그람 음성균은 펩티도글리칸성분의 함량이 20% 정도로 적기 때문에 에탄올에 의해 탈색되어 사프라닌에 의해 자홍색으로 대조염색된다.#
그람 양성균은 보통 1개의 세포막을 가지며, 이를 두꺼운 펩티도 글리칸 층이 덮고 있다. 반면 음성균은 세포막 위에 얇은 펩티도글리칸 층이 있고, 그 위에 세포막과 같은 구조의 외막이 있으며 이를 지질다당류(LPS)층이 있어 결론적으로 2개의 세포막을 가진다.[5]
1. 개요
덴마크의 미생물학자인 한스 크리스티안 요아힘 그람(Hans Christian Joachim Gram)이 개발한 세균 염색법이다.
이 염색법을 통해 세포 벽의 펩티도글리칸 두께에 따라 모든 세균을 크게 두 가지로 분류할 수 있다. 그람 염색이 중요한 이유는, 양성이냐 음성이냐로 해당 균종을 배양 혹은 살균하는 적합한 방법을 찾을 수 있기 때문이다.
2. 시행 방법
'''그람 염색의 과정은 다음과 같다.'''
- 1단계 : 염색
균을 자색의 염기성 용액인 크리스탈 바이올렛으로 약 1분간 염색한다. 이 과정에서 모든 세균이 자색으로 염색된다.
- 2단계 : 착색
염색된 세균을 매염제인 아이오딘 용액으로 약 1분간 처리하여 착색한다. 이 과정에서 크리스탈 바이올렛과 아이오딘의 반응으로 세포 내에 불용성 복합체가 형성된다.
- 3단계 : 탈색
착색된 세균을 약 15초간 에탄올 처리하여 불용성 복합체를 용해시켜 탈색한다. 그람 양성균은 세포벽 내의 펩티도글리칸 함량이 높으므로 복합체가 용해되지 않고 남아 완전히 탈색되지 않는다.
- 4단계 : 대조염색
탈색과정을 거친 적색의 염기성 용액인 사프라닌으로 약 40초간 대조염색한다. 이전 과정에서 탈색되었던 그람 음성균만 대조염색된다.
위의 과정을 거치면 염색된 결과에 따라 세균을 다음과 같이 분류할 수 있다.이는 세균의 세포벽의 구성성분인 펩티도글리칸의 함량차이에 의한 것이다. 그람 양성균은 세포벽에 펩티도글리칸성분이 80% 정도로 많기 때문에 에탄올에 탈색되지 않아 크리스탈 바이올렛의 자색을 그대로 유지하는 반면, 그람 음성균은 펩티도글리칸성분의 함량이 20% 정도로 적기 때문에 에탄올에 의해 탈색되어 사프라닌에 의해 자홍색으로 대조염색된다.#
그람 양성균은 보통 1개의 세포막을 가지며, 이를 두꺼운 펩티도 글리칸 층이 덮고 있다. 반면 음성균은 세포막 위에 얇은 펩티도글리칸 층이 있고, 그 위에 세포막과 같은 구조의 외막이 있으며 이를 지질다당류(LPS)층이 있어 결론적으로 2개의 세포막을 가진다.[5]
3. 관련 분류
[1] 덴마크어. 고안자인 한스 크리스티안 그람(Hans Christian J. Gram)의 이름을 따서 명명되었다.[2] 영어식 미생물학 용어.[3] 크리스탈 바이올렛에 의해 착색[4] 사프라닌에 의해 착색[5] Nick Lane,'미토콘드리아:박테리아에서 인간으로, 진화의 숨은 그림자',김정은 역,뿌리와이파리,2009,p191